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在PEG介导细胞融合时,有哪些优缺点?

在PEG介导细胞融合时,优点是对细胞毒性较小,融合细胞易于存活。缺点为使用前需要病毒的繁殖与灭活,操作繁琐,如灭活不完全则易对实验人员造成伤害,因此现在一般不使用此方法。

细胞膜有内外两层,细胞融合首先发生在外层,然后再到内层,由此就出现了两种融合通道,细胞体内物质通过这两种通道转移。病毒膜与目标细胞融合时,只出现一种融合通道,即导致融合的基因只能在病毒中找到,而在目标细胞中却找不到。

PEG介导法

为我国学者高国楠首创,是借助化合物PEG、磷酸钙及高pH条件下诱导原生质体提取外源DNA分子。PEG是细胞融合剂,可通过引起细胞膜表面电荷的紊乱,干扰细胞间的识别,从而有利于细胞间融合和外源DNA分子进入原生质体。碳酸钙可与DNA结合形成DNA-碳酸钙复合物而被原生质体摄入。